大巴车在晚上2点至5点必须停车休息，这是根据相关法律规定的要求。

长途车、货车以及大巴车在凌晨2点至5点必须停车休息。为了确保安全，客运企业需要严格遵守驾驶时间和休息时间的规定。对于线路固定的机场、高铁快线以及单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在保证安全的前提下，不受凌晨2点至5点的通行限制。但是，长途客运车辆在凌晨2点至5点之间必须停车休息，以确保驾驶员的休息时间。这是为了防止疲劳驾驶，保障乘客的安全。

根据《道路旅客运输企业安全管理规范》第三十八条，客运企业需要严格遵守驾驶时间和休息时间的规定。具体要求包括：

• 日间连续驾驶时间不得超过4小时，夜间连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间应不少于20分钟；
• 在24小时内累计驾驶时间不得超过8小时；
• 任意连续7日内累计驾驶时间不得超过44小时，期间有效落地休息；
• 禁止在夜间驾驶客运车辆通行达不到安全通行条件的三级及以下山区公路；
• 长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输；
• 从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。

对于大巴车在高速公路上的夜间行驶，必须遵守一些规定。例如，必须配备两名或以上的驾驶员，其中至少有一名具备资质、经考核合格的驾驶员。驾驶员在夜间2时至5时之间运营时，必须在公司规定的休息点停车换人。在休息点待班的驾驶员要保证有充分休息的时间，并确保在每天夜班接班前有不低于6小时的强制卧床休息时间。每班车执行驾驶员落地换人时，下车休息的随车驾驶员不得低于1人，另一名未下车的随车驾驶员不得立即驾驶大巴车，必须由新换上车的驾驶员驾驶。在交接班期间，要提前做好旅客安全告知和其他相关服务工作，确保旅客的人身和财产安全。下车休息的驾驶员必须在交班后1小时内强制卧床休息，与第二次轮换上车的间隔时间不得低于8小时。夜间22时至次日凌晨6时之间，驾驶员连续驾驶时间不得超过2小时，每次停车休息时间不得少于25分钟。同时，高速公路最高速度不得超过80公里/小时。